En dépit de ces traités, l'Espagne n'en demeurait pas moins sur ses positions et refusait encore à accorder aux marchands français et anglais le droit de commerce avec ses colonies américaines. Ainsi le principe «Pas de paix au-delà de la Ligne» trouva-t-il, plus que jamais, sa justification, principe d'ailleurs reconnu par une clause secrète du traité de Vervins entre la France et l'Espagne. Dans les 20 premières années du XVIIe siècles, les aventuriers français, plutôt corsaires que contrebandiers, surtout normands, encore, qui ont pour noms Aigremont, Pontpierre, Fleury, Saint-Georges, Chauvin et autres, vont troubler le commerce espagnol dans les Antilles en association tantôt avec quelques Anglais, car ils sont moins nombreux désormais à aller dans ces mers, tantôt avec des Néerlandais, nouvel ennemi avec lesquels devront désormais compter les Espagnols. Certains de ces capitaines ou de leurs hommes qui sont ce que l'on peut qualifier de premiers flibustiers français, jetteront, avant même la fin des années 1620, les bases de la colonisation non-espagnole dans les Antilles.

port et ville de San Agustín (Floride)
anonyme, 1655

En effet, ce n'était pas seulement la présence de contrebandiers et de corsaires dans mers des Caraïbes qui inquiétaient le roi d'Espagne mais aussi l'éventualité de la fondation de colonies étrangères à la périphérie de son empire des Indes. Déjà au siècle précédent, quelques centaines de protestants français s'étaient établis au nord de la Floride, dans l'actuel état de Caroline du Sud. L'amiral Pedro Menéndes de Avilés, qui avait précédemment réorganisé et dirigé les flottes aux trésors, mit un terme dramatique à cette entreprise française, en 1565, en mettant à sac la petite colonie baptisée Fort Caroline en l'honneur du roi Charles IX, et en massacrant tous les habitants qui n'avaient pas réussi à prendre la fuite. En s'exécutant, il prit soin de spécifier que ce n'était point contre les Français qu'il agissait ainsi mais contre des hérétiques. Cette action va contribuer grandement dans l'esprit des rivaux de l'Espagne à grossir et même exagérer la réputation de cruauté des Espagnols en Amérique. De là, elle servira de prétexte à presque toutes les agressions de représailles entreprises par des corsaires, des pirates et contrebandiers étrangers, en temps de paix, jusqu'à la fin du XVIIe siècle.

Dans le milieu des années 1620, après des tentatives plus ou moins heureuses en Guyane, les Anglais et les Français vont pourtant commencer à s'implanter dans les Petites Antilles, ces îles inutiles, dédaignées des Espagnols, desquelles ils chasseront graduellement les Indiens Caraïbes. Plus importante cependant sera, jusqu'au milieu du siècle, l'action des Néerlandais contre les Espagnols en Amérique. À la fois pirates, rebelles et hérétiques, ces anciens sujets du Habsbourg qui occupe les trônes de Castille et d'Aragon depuis un siècle déjà livreront à ce maître d'hier une guerre impitoyable.